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NGX6對Wnt/Beta-catenin信號傳導通路下游靶分子的影響及其與Wnt
畢業(yè)論文
全部作者: | 劉芬 沈守榮 王曉艷 李宏韜 彭婭 廖曼甜 郭勤 劉劼 |
第1作者單位: | 中南大學湘雅3醫(yī)院消化內科 |
論文摘要: | 目的:(1)探討NGX6基因對結腸癌Wnt/Beta-catenin信號傳導通路下游靶分子的影響,明確NGX6對Wnt/Beta-catenin信號傳導通路是否存在抑制作用。(2)阻斷Wnt通路對NGX6轉錄水平表達的影響,明確NGX6與Wnt通路之間是否存在反饋調節(jié)。方法:(1)將pCMV-myc-NGX6真核表達載體及pCMV-myc空白載體瞬時轉染結腸癌細胞系SW620,采用Western-blot的方法檢測轉染NGX6前后Wnt/Beta-catenin信號傳導通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表達。(2)構建LEF1缺失突變體(缺乏N-末端β-catenin binding domain)pcDNA3.1(+)-LEF1DN瞬時轉染SW620細胞,阻斷Wnt通路,并通過Western-blot及TCF-4熒光素酶報告質粒檢測的方法確定阻斷的效果.(3)通過RT-PCR檢測Wnt通路阻斷后NGX6的表達改變情況,判斷Wnt通路與NGX6之間是否存在反饋調節(jié)作用。結果:(1) NGX6基因瞬時轉染結腸癌細胞系SW620后,可以明顯下調Wnt/Beta-catenin信號傳導通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表達.(2)成功構建真核表達載體pcDNA3.1(+)-LEF1DN, Western-blot及TCF-4熒光素酶報告質粒均證實pcDNA3.1(+)-LEF1DN對Wnt通路具有阻斷作用(3)瞬時轉染pcDNA3.1(+)-LEF1DN抑制Wnt通路后,NGX6在轉錄水平的表達有上升。結論:(1)NGX6對Wnt/Beta-catenin信號傳導通路下游靶分子具有負性調節(jié)作用。(2)阻斷Wnt通路對NGX6的表達有影響,Wnt通路與NGX6之間可能存在反饋調節(jié)作用。 |
關鍵詞: | NGX6基因; 結腸癌; 信號傳導; Wnt/beta-catenin 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
發(fā)表日期: | 2007年12月19日 |
同行評議: | (暫時沒有) |
綜合評價: | (暫時沒有) |
修改稿: |
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