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黃連解毒湯對2型糖尿病大鼠靶組織葡萄糖轉(zhuǎn)運子4的影響
【關(guān)鍵詞】 2型糖尿病; 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白; 胰島素; 空腹血糖黃連解毒湯(Huanglian Jiedu Decoction, HLJDD)出自唐代名醫(yī)王燾之《外臺秘要》,是清熱解毒的代表方,由黃連、黃芩、黃柏和梔子組成,傳統(tǒng)上臨床主要用于治療相當于熱毒證的感染性疾病。而最近世界權(quán)威雜志相繼報道黃連解毒湯中梔子提取物京尼平[1]和黃連提取物黃連素[2]均能有效治療糖尿病。本研究所的前期研究也證明,黃連解毒湯具有降血糖,調(diào)血脂的功效[3~5],為了進一步深入探討其治療2型糖尿病的機制,本實驗觀察了黃連解毒湯對2型糖尿病大鼠脂肪和肌肉組織胰島素信號轉(zhuǎn)導通路中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(glucose transporter 4, GLUT4)表達及轉(zhuǎn)位的影響,旨在探討該方改善胰島素抵抗和防治2型糖尿病的作用機制。
1 材料與方法
1.1 實驗動物及飼料 雄性健康Wistar大鼠,約2月齡,200~220 g,清潔級,購于湖北省實驗動物研究中心。基礎(chǔ)飼料購于同濟醫(yī)學院實驗動物中心,高脂高熱量飼料按配方(蔗糖∶豬油∶奶粉∶雞蛋∶基礎(chǔ)飼料=30∶20∶4∶2∶63)配制。
1.2 藥物及試劑 黃連解毒湯,由黃連、黃芩、黃柏和梔子按3∶2∶2∶3的比例組成,其藥材購于武漢同濟醫(yī)院,按吳洪元等[6]報道的方法煎煮取汁,濃縮成浸膏(1 g浸膏相當于1.5 g黃連解毒湯生藥),以薄層掃描方法測得其所含小檗堿為27 mg/g。臨用前以含0.5%羧甲基纖維素的PBS溶液(pH 7.4)配制成含小檗堿9.375 g/L的混懸液。阿司匹林(aspirin, ASP),石家莊神威藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品,臨用前以含0.5%羧甲基纖維素的PBS溶液(pH 7.4)配制成含阿司匹林12 g/L[7]的混懸液;鏈脲佐菌素(streptozotocin, STZ),Sigma公司產(chǎn)品;胰島素放免試劑盒,北方生物技術(shù)研究所產(chǎn)品;蛋白測定試劑盒,南京建成生物工程研究所產(chǎn)品;蛋白Marker,F(xiàn)ermentas Life Science公司產(chǎn)品;單克隆GLUT4抗體,R
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