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Humanin的基因克隆及序列測(cè)定
【關(guān)鍵詞】阿爾茨海默病
作者簡(jiǎn)介:靳輝(1973),女(漢族),解剖學(xué)碩士.研究方向:阿爾茨海默病的病理機(jī)制及防治.
摘要:目的利用基因工程方法對(duì)Humanin進(jìn)行基因克隆并測(cè)定其序列,為進(jìn)一步對(duì)阿爾茨海默病進(jìn)行基因治療奠定基礎(chǔ)。方法采用非對(duì)稱(chēng)互補(bǔ)引物/模板法,制備兩端含有酶切位點(diǎn)的Humanin的cDNA,將其克隆入pVAXI載體中并測(cè)序。結(jié)果經(jīng)酶切鑒定、測(cè)序分析,表明所插入的基因片斷為Humanin基因,與設(shè)計(jì)完全相同。結(jié)論成功地克隆了Humanin基因。
關(guān)鍵詞:阿爾茨海默;Humanin;基因克;序列測(cè)定
ABSTRACT:ObjectiveTousegeneengineeringtechniquetocloneandsequencetheHumanin.MethodsBymeansofasymmetricalprimer/template,doublestrandedcDNAofHumaninwasconstructed,whichhadrestrictionenzymessitesonthetwoextremes.ThenthecDNAwassubclonedintotheplasmidpVAXIandsequenced.ResultsEvidencesofDNAsequenceanalysisandrestrictionenzymesdigestionshowedthattheinsertedfragmentwasHumanincDNA,consistentwiththefragmentwedesigned.ConclusionTheHumanincDNAwasclonedsuccessfully.
KEYWORDS:Alzheimer
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