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寄生蟲實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種
人類應(yīng)用殺蟲劑防制蚊蟲已有70年歷史。40年代初二二三問世后,在全球范圍內(nèi)均作為滅蚊的主要?dú)⑾x劑,但不到10年就發(fā)現(xiàn)蚊媒對(duì)二二三的抗藥性成為滅蚊的主要障礙。我國(guó)在50年代中后期開始大規(guī)模使用有機(jī)氯等合成殺蟲劑防制蚊蟲,抗藥性亦隨著殺蟲劑用量的增長(zhǎng)和品種的發(fā)展而演變。
目前,庫(kù)蚊抗藥性的監(jiān)測(cè)和研究報(bào)道較多,但有關(guān)嗜人按蚊抗藥性的監(jiān)測(cè)和研究較少[1~6]。媒介按蚊對(duì)殺蟲劑敏感性監(jiān)測(cè)是目前滅蚊防瘧工作的重要內(nèi)容之一。在嗜人按蚊區(qū),進(jìn)行殺蟲劑敏感性測(cè)試,包括WHO推薦的區(qū)分劑量和LT50或LC50測(cè)試,是很有必要的。通過定期監(jiān)測(cè),了解蚊群對(duì)當(dāng)時(shí)使用的殺蟲劑的敏感程度,抗性的分布和程度,對(duì)可能替代的殺蟲劑敏感性以及對(duì)已產(chǎn)生抗性的殺蟲劑停止使用后蚊群敏感性恢復(fù)程度,為瘧疾防治合理使用殺蟲劑提供科學(xué)依據(jù)。現(xiàn)將國(guó)內(nèi)各地有關(guān)嗜人按蚊對(duì)常用殺蟲劑的敏感性監(jiān)測(cè)概況介紹如下。
1 試驗(yàn)材料
1.1 成蟲來(lái)源
采集從現(xiàn)場(chǎng)(監(jiān)測(cè)點(diǎn))捕獲嗜人按蚊吸血的成蚊,帶回實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)卵孵化幼蟲飼養(yǎng),蛹羽化后24h內(nèi)測(cè)定;驕y(cè)試前夜捕捉剛吸血之蚊蟲,帶回實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)至次日上午供測(cè)試用,此時(shí)胃血消化約在謝拉氏Ⅲ~Ⅳ期。
1.2 試驗(yàn)藥物
二二三、馬拉硫磷、溴氰菊酯和氯菊酯,含量在95%以上。
1.3 制備藥膜濾紙
98%溴氰菊酯(法國(guó)產(chǎn)),按WHO要求制作藥膜濾紙,含溴氰菊酯3.57mg/m2(濃度0.01%),8.93mg/m2(濃度0.025%),或其它濃度。
2 測(cè)試方法
參照WHO 585號(hào)(1976)、655號(hào)(1980)、818號(hào)(1992)等技術(shù)報(bào)告;劉維德等:“七種病媒蚊類對(duì)擬除蟲菊酯抗性分布及防治對(duì)策研究”;“我國(guó)尖音庫(kù)蚊種團(tuán)抗藥性現(xiàn)狀—兼論半數(shù)致死劑量與區(qū)分劑量的關(guān)系”。論述用蚊蟲敏感品系LT99.9乘2或用死亡率99.9%~100.0%之間的劑量作為檢測(cè)蚊類抗藥性的區(qū)分劑量。
2.1 我國(guó)區(qū)分劑量法(我國(guó)推薦:溴氰菊酯3.57mg/m2,濃度0.01%)
蚊蟲接觸藥膜濾紙30min,恢復(fù)飼養(yǎng)24h,記錄死亡率。死亡率>99%為敏感群體(S),死亡率80%~98%為初步抗性群體(M),死亡率<80%為抗性群體(R),并設(shè)空白對(duì)照。
2.2 WHO區(qū)分劑量法(WHO推薦:溴氰菊酯8.93mg/m2,濃度0.025%)
蚊蟲接觸藥膜濾紙60min,恢復(fù)飼養(yǎng)24h,記錄死亡率。設(shè)立對(duì)照和評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)同上。
2.3 半數(shù)致死時(shí)間(LT50)測(cè)定
即以一種濃度測(cè)試不同接觸時(shí)間(如15min、25min、35min、45min、55min)。接觸后,將蚊蟲置蚊籠內(nèi)飼養(yǎng)24h,計(jì)算死亡率。至少重復(fù)實(shí)驗(yàn)1次,另設(shè)對(duì)照。死亡率按Abott公式校正,用回歸分析方法計(jì)算LT50及LT95。
3 結(jié)果
3.1 區(qū)分劑量測(cè)定結(jié)果
3.1.1 四川的嗜人按蚊對(duì)四種殺蟲劑在實(shí)驗(yàn)室和現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定的結(jié)果 PP′-二二三接觸1h,濃度在10.0g/L以上時(shí),死亡率多數(shù)接近100.0%;在10.0g/L以下,死亡率只有67.78%。溴氰菊酯對(duì)實(shí)驗(yàn)室品系,濃度在0.6g/L~2.0g/L之間,接觸30~60min,死亡率最高僅90.48%;現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試濃度在0.01g/L以上,接觸30~64min,死亡率在90.83%~100.0%。氯菊酯用1.0g/L濃度,接觸60~64min,死亡率為93.33%~100.0%。馬拉硫磷用1.0g/L濃度,接觸16~32min,死亡率為96.30%~100.0%(表1)。
根據(jù)以上結(jié)果,初步建議嗜人按蚊對(duì)四種殺蟲劑的區(qū)分劑量如下:PP′-二二三:濃度10g/L,1h;溴氰菊酯,濃度1.0g/L,接觸30min;氯菊酯:濃度1.0g/L,接觸1h;馬拉硫磷:濃度1.0g/L,接觸20min。
3.1.2 湖北省溴氰菊酯3.57mg/m2(濃度0.01%)區(qū)分劑量法測(cè)定的結(jié)果 湖北省從1990年開始以15mg/m2溴氰菊酯浸泡蚊帳滅蚊防瘧。1995年調(diào)查結(jié)果表明,中華按蚊、嗜人按蚊成蚊對(duì)溴氰菊酯并未出現(xiàn)抗性。以WHO制訂的區(qū)分劑量測(cè)試,浸帳4年組和浸帳1年組死亡率無(wú)區(qū)別,均為100%。但以我國(guó)推薦的區(qū)分劑量測(cè)試,雖無(wú)抗性群體,敏感群體亦只有2個(gè),初抗群體占調(diào)查點(diǎn)的83%(表1)。這種差異似與兩者的區(qū)分劑量不同有關(guān),我國(guó)推薦的溴氰菊酯劑量為3.57mg/m2,WHO推薦的為8.93mg/m2。
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