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小鼠不同部位骨髓組織病理切片分析
骨髓存在于長骨的骨髓腔,扁骨和不規(guī)則骨的松質(zhì)骨中,以下是小編搜集整理的一篇小鼠不同部位骨髓組織病理切片探究的論文范文,供大家閱讀查看。
小鼠不同部位骨髓組織病理切片分析
骨髓是機(jī)體的主要造血器官,由骨髓實(shí)質(zhì)和造血微環(huán)境組成,其造血功能的強(qiáng)弱可通過骨髓病理切片反應(yīng)出來。當(dāng)骨髓被致病因素抑制時,骨髓實(shí)質(zhì)分化增殖不良,造血微環(huán)境的改變均可導(dǎo)致機(jī)體造血功能下降.因此,眾多實(shí)驗(yàn)研究者通常選擇制作骨髓組織病理切片并觀察其鏡下特點(diǎn),以此作為檢測造血系統(tǒng)損傷的指標(biāo)之一。
在大量實(shí)驗(yàn)研究制作小鼠骨髓病理切片時,實(shí)驗(yàn)者大多選擇將小鼠處死后取其股骨,作為制作切片的主要取材部位,也有研究報(bào)道采用取小鼠腰椎骨髓或胸骨骨髓的方法制作骨髓病理切片。對于選取何處病理組織制作切片最能反映機(jī)體的造血功能,尚鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過選取小鼠不同部位骨髓組織制作病理切片,鏡下觀察其骨髓實(shí)質(zhì)及造血微環(huán)境,探尋能夠更好反映小鼠骨髓病理變化的部位,為今后動物實(shí)驗(yàn)制作骨髓病理切片的取材部位選擇提供理論依據(jù)。
1材料和方法
1.1實(shí)驗(yàn)動物
健康SPF級昆明種小鼠10只,雄性,6~8周齡,體重18~22g,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供【SCXK(陜)2013-001】,在陜西中醫(yī)藥大學(xué)中藥藥理實(shí)驗(yàn)室【SYXK(陜)2007-006】中取材。
1.2儀器與材料
E220光學(xué)生物顯微鏡(0lympus公司)、病理圖文系統(tǒng)分析工作站、輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)、推片與烤片兩用器、蘇木精-伊紅(HE)染液等。
1.3方法
健康SPF級昆明種小鼠10只,適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后,頸椎脫臼處死并解剖,分別取小鼠脛骨、股骨、顱骨、胸骨、髂骨等5個不同部位制做骨髓病理切片,常規(guī)HE染色,40倍光鏡下觀察并拍照。
2結(jié)果
光鏡下各部位骨髓切片均可見不同分化階段粒、紅、巨核細(xì)胞,但脛骨、股骨骨髓切片鏡下脂肪細(xì)胞較多,支架結(jié)構(gòu)較疏松;顱骨、胸骨骨髓切片鏡下造血紅系、粒系細(xì)胞數(shù)量較少,微環(huán)境排列較松散;唯有髂骨骨髓切片鏡下紅系、粒系細(xì)胞大量存在,分布均勻且排列緊密,血竇和巨核細(xì)胞清晰,粒細(xì)胞胞漿嗜堿性,增生活躍,并可見核分裂像,骨髓造血組織支架結(jié)構(gòu)緊密且脂肪細(xì)胞數(shù)量較少,可較好的反映骨髓的造血功能。因此,可將髂骨作為制作骨髓病理切片的首選取材部位(彩插5圖1).
3討論
骨髓存在于長骨(如脛骨、股骨)的骨髓腔,扁骨(如髂骨、肋骨)和不規(guī)則骨(胸骨、脊椎骨等)的松質(zhì)骨中,觀察骨髓切片可以全面了解骨髓造血細(xì)胞的增生程度、分布及細(xì)胞密度,還可以反應(yīng)骨髓細(xì)胞原先的面貌[10].小鼠出生時,全身骨髓腔內(nèi)充滿具有造血功能的紅骨髓,隨著年齡增長,骨髓中脂肪細(xì)胞逐漸增多,相當(dāng)一部分紅骨髓被沒有造血功能的黃骨髓取代,僅在椎管、胸骨、肋骨、髂骨、顱骨及股骨和肱骨上端的松質(zhì)內(nèi)保留有紅骨髓?紤]到在制作骨髓病理切片時,椎管、顱骨等部位取材較困難,目前實(shí)驗(yàn)研究多選取小鼠股骨作為制作骨髓病理切片的主要部位。但因具有造血功能的紅骨髓多存在于股骨上端的骨松質(zhì)內(nèi),在制作骨髓切片時不易將其與位于股骨干內(nèi)的黃骨髓分離,因此鏡下觀察股骨骨髓病理切片脂肪細(xì)胞較多,造血細(xì)胞比例明顯下降,不利于反映骨髓的造血功能。
本實(shí)驗(yàn)通過對比小鼠不同部位的骨髓病理切片,鏡下觀察骨髓實(shí)質(zhì)和造血微環(huán)境,發(fā)現(xiàn)小鼠髂骨較顱骨、胸骨、股骨、脛骨等其他部位骨髓切片顯示造血細(xì)胞更清晰、分布更均勻,其支架結(jié)構(gòu)更緊密,脂肪細(xì)胞含量較少,且實(shí)驗(yàn)的可行性和操作性較強(qiáng),可作為制作骨髓病理切片的一個最佳取材部位。
小鼠不同部位骨髓組織病理切片分析
對小鼠不同部位骨髓組織進(jìn)行病理切片分析時,實(shí)驗(yàn)者通常選取股骨作為主要取材部位。但是,股骨中具有造血功能的紅骨髓主要存在于股骨上端的骨松質(zhì)內(nèi),制作切片時不易將其與位于股骨干內(nèi)的黃骨髓分離。因此,鏡下觀察股骨骨髓病理切片時,脂肪細(xì)胞較多而造血細(xì)胞比例明顯下降,不利于反映骨髓的造血功能。
本實(shí)驗(yàn)通過對比小鼠不同部位的骨髓病理切片,發(fā)現(xiàn)小鼠髂骨的骨髓切片顯示造血細(xì)胞更清晰、分布更均勻、支架結(jié)構(gòu)更緊密且脂肪細(xì)胞含量較少。此外,選取髂骨作為取材部位的可操作性和可行性也較強(qiáng)。
值得注意的是,骨髓存在于長骨如脛骨、股骨的骨髓腔和扁骨如髂骨、肋骨以及不規(guī)則骨如胸骨、脊椎骨等,對于選取何處病理組織制作切片最能反映機(jī)體的造血功能,尚鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)僅為拋磚引玉,今后的研究可對不同部位骨髓組織切片進(jìn)行更全面的觀察和分析,綜合評判其對反映造血功能的代表性。
總結(jié)來說,小鼠不同部位骨髓組織病理切片具有差異性。髂骨在小鼠骨髓切片分析中顯示出較好的實(shí)驗(yàn)效果,可以作為制作骨髓病理切片的一個潛在最佳取材部位。
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