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淺談酶聯(lián)免疫吸附試驗實驗教學思考的分析論文
【摘要】酶聯(lián)免疫吸附試驗是廣泛應用于臨床檢驗診斷的免疫學檢驗技術，實驗教學中采用該技術檢測“乙肝兩對半”。為適應中職生教育人才培養(yǎng)模式的教學改革，使學生符合具有“理論知識適度、技術應用能力強”的要求，我們對實驗教學內容和方法進行改革，從適用性角度選題，通過實驗操作考核，采取以考促學的手段，加強酶聯(lián)免疫吸附試驗的訓練力度，提高學生實驗操作能力，培養(yǎng)學生獨立工作的能力。
【關鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗；免疫學檢驗；實驗；考核
酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme－linkedimmunosorbentassay，ELISA)是廣泛應用于臨床檢驗診斷的免疫學檢驗技術。該技術集基本理論、基本技能為一體，能使學生能對前期所學的理論知識及技能進一步加強和提高，是一個能為學生進人臨床實習打好基礎的系統(tǒng)實訓。目前該技術的臨床檢測多采用商品化的ELISA試劑盒，實驗步驟較少，操作簡單。然而，參與反應的成分很多，如抗原抗體濃度、酶結合物濃度以及試劑的質量控制等等，影響因素眾多。傳統(tǒng)的實驗教學中，實驗材料的準備、儀器的準備及調試、標本及試劑的處理等工作基本上是由教師包辦。實驗的許多環(huán)節(jié)學生沒有親自做，因而在實驗完成后，部分學生對實驗還是一知半解，更談不上能力的鍛煉和培養(yǎng)［1］。為適應中職生教育人才培養(yǎng)模式的教學改革，使學生符合具有“理論知識適度、技術應用能力強”的要求，對免疫學檢驗實驗教學內容和方法進行改革勢在必行。為此我們通過實驗技能操作考核，采取以考促學的手段，加強了酶聯(lián)免疫吸附試驗內容的訓練力度，也收到了一定的效果，以下談談我們的做法及效果。
1精選考核內容，以適應臨床實踐的需要
考核內容的選擇上以圍繞臨床實際進行選擇，真正使學生做到學以致用。不但要讓學生了解、掌握先進的免疫學檢驗技術和操作方法，還必須著重培養(yǎng)學生的創(chuàng)造性思維和綜合分析問題的能力，從而全面提高學生素質［2］。ELISA由于操作簡單、靈敏度高、可定性定量，在臨床檢驗診斷中應用最為廣泛。常用于如病毒性肝炎、艾滋病、皰疹等傳染性疾病的檢測診斷，還常用于補體、免疫球蛋白和腫瘤標志物的檢測。要想在有限的課時里完成諸多的內容訓練，顯然是不現(xiàn)實的。因此我們僅選擇了最具有代表性的“乙肝兩對半”檢測作為該技術的訓練及考核內容�！耙腋蝺蓪Π搿惫灿形屙棛z測項目，即HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，實驗中所需要的實驗器材均能由檢驗實驗室提供，易于準備，給學生提供了選擇和發(fā)揮的空間。實驗過程中所需要的待測血清標本為陽性或陰性標準物，不具傳染性，保證了學生實驗的安全性。學生只要掌握了“乙肝兩對半”的檢驗程序和檢驗方法，其他在臨床上需要用ELISA技術檢測的常見項目則觸類旁通，能起到事半功倍的效果，至于少見的、較為復雜的檢測項目可以在日后的實習及工作中繼續(xù)學習。
2調整考核內容，可行性及針對性強
酶聯(lián)免疫吸附試驗教學內容在學時安排上有6課時，理論與實驗課課時之比為1．1。以往的教學形式為先理論授課，教師講解實驗的原理及檢驗程序，實驗教學中教師講解后進行示范教學，學生照葫蘆畫瓢的再做實驗;實驗操作考核只設HBsAg項目的考核，考核項目單一、形式單一。學生只需完成實驗操作，報告結果即可。而現(xiàn)行的考核內容是“乙肝兩對半”的共五項檢測項目，各個項目的檢驗過程如標本的稀釋、試劑選擇、加樣順序有所不一。從限制考核時間的角度考慮，學生在考核時隨機抽考其中的一個項目，由考生自主選擇所需物品進行實驗操作，這樣增加了考試的隨機性和靈活性。雖然抽考使得考核難度增加，但能強化學生對ELISA檢測乙肝兩對半操作步驟的理解。當學生抽到題目后，在熟悉操作步驟的基礎上，只要懂得該項目檢測時需注意的細節(jié)，如檢測HBcAb需將血清稀釋50倍，HBeAb的檢測需加入中和試劑，學生在對離心機、水浴箱及微量移液器的使用相當熟悉的基礎上，不難將標本中的結果如實地檢測出來。
3考核的形式
學生重理論、輕實驗的現(xiàn)象普遍存在，有的學生每操作一步就看一下筆記，或者是詢問其他同學，有的學生甚至希望教師能一步步的教，因而學生對酶聯(lián)免疫吸附試驗缺乏系統(tǒng)的認知。我們將考核的形式設計有理論測試(占30分)和操作考核(占70分)。通過調整考核內容，將能力培養(yǎng)貫穿于整個訓練過程，將單純理論教學融合于實驗教學中，能把理論知識激活，也強化了學生的實驗操作能力及解決問題、分析問題能力。理論測試采用本教研室的計算機交互平臺進行，根據(jù)教學內容特點，理論測試我們進行這樣的設計，首先收集乙肝兩對半檢測相關試題，建立題庫，內容涉及實驗原理、操作、材料、結果觀察及臨床意義。如(1)乙肝兩對半檢測涉及ELISA的哪些原理?分別檢測什么項目?(2)通過各反應孔顯色，判斷疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽”、“小三陽”;(3)手工洗滌有何要求;(4)加終止液的目的是什么;(5)ELISA常用的酶是哪種?其底物是什么。共組10套試題，學生抽簽后通過計算機交互平臺指向性地發(fā)布試題、進行考試。考慮到學生對理論考試容易產(chǎn)生畏難情緒，在題型的設計上，設有填充題，標示題、連線題及填空題等，內容直觀、清晰，學生“寓考于樂”，在輕松愉快的心理環(huán)境下地完成理論測試。
4考試評分嚴謹，設計合理
理論考核從試題集中抽取出6道題組卷，每題5分，共30分。操作考核的評分項目包括:專業(yè)素質(衣著儀表、考試態(tài)度、紀律)5分;實驗準備(實驗用品、試劑的預處理、標本處理、標記記錄)5分;實驗步驟(加樣、微量移液器的使用、孵育、洗滌、顯色)35分，結果觀察10分;操作后清場(試劑、器材歸位、實驗臺面清理)5分，綜合評價(規(guī)定時間完成、實驗后清場、消毒等)10分，共70分。評分標準于考試前告知學生，給學生能充分地復習和準備，注意操作細節(jié)，提高考試質量�？荚嚂r每個學生獨立完成試驗，教師全程監(jiān)考，及時對出錯環(huán)節(jié)扣分，評出總分。
5效果分析
在酶聯(lián)免疫吸附試驗的實驗教學中，采用考核方式，取得了以下成效。
5．1利于調動學生的主觀能動性，激發(fā)起學習的熱情
實驗操作考核綜合反映出學生的實驗預習、實驗過程和實驗態(tài)度等各方面的表現(xiàn)�？己顺煽冋计谀┛偝煽兊�30%，將學生實驗考核計入課程總成績后，學生上實驗課的目的性增強，課上都搶著做實驗，從以往實驗缺乏主動性，不預習，不復習，變?yōu)榉e極思考，認真準備。實驗報告抄襲現(xiàn)象也明顯減少，改變了重理論輕實踐的現(xiàn)象［3］。從學生提出的問題，如溶血標本可以檢測“乙肝兩對半”嗎?如果用溶血標本檢測，會有什么影響，會影響什么試劑?從這些問題的提出可以看出，學生懂得對實驗進行思考，也懂得遇到問題主動和老師商量，學生不斷發(fā)現(xiàn)問題、思考問題、解決問題的能力得到提高。
5．2獨立工作能力的培養(yǎng)
獨立工作能力是一個醫(yī)學檢驗工作者最基本素質，中職生畢業(yè)后就業(yè)單位多是基層醫(yī)院，基層醫(yī)院的檢驗科可能只有1至2名檢驗員，每天的檢驗工作任務都要獨立完成。因而學生在就學期間即應注重獨立工作能力培養(yǎng)。在實驗考核過程中，實驗物品的選擇、擺放，實驗結束后操作臺的清理等，是學生自己準備和獨立完成。學生在考核時需考慮到考核時間的限制，因此只有熟悉基本的理論知識、熟練基本操作，才能在規(guī)定時間內完成實驗，得出正確的結果，考試前不做好準備實驗將無法順利完成。
5．3實驗基本技能的訓練
由于酶聯(lián)免疫吸附試驗涉及環(huán)節(jié)多，通過考試能綜合考核學生的基本實驗技術，如移液管的準確吸樣，血清等倍稀釋的方法;能考察學生對常用儀器設備如離心機、恒溫孵育箱、酶標儀、洗板機的操作;在對血清標本進行檢測時，使用過的物品如棉簽、試管、注射器的正確處置，能增強學生的無菌操作技術和觀念。
5．4學生的評價及反饋
此考核方案在兩屆學生進行了實施，通過操作考核，學生們得到較為系統(tǒng)的訓練，對ELISA檢測乙肝兩對半的整個流程有了較為深刻的認識。有必要開展，通過考核能更好地將理論與實踐相結合，學生能自如地、成功地檢測出標準物血清標本的正確結果，同時也很有成就感，增強了對實習及將來的工作的信心。在對2013級的學生進行實習情況跟蹤、訪談中得知，學生普遍認為，ELISA技術在臨床免疫檢驗診斷中應用廣泛，用此技術檢測的項目多，工作量較大。由于在操作考核強化了技能，在實習老師的指導下，能很快地進入角色，增強了工作自信心。對學生進行實驗考核的同時，也對教師提出了更高要求。教師準備的理論測試問題在內容上需與臨床免疫檢驗接軌，使考核更科學合理化。規(guī)范實驗教學，嚴謹、規(guī)范示作好示教。學生操作過程中，巡視督查，及時糾正學生的錯誤。以考促學法強化酶聯(lián)免疫吸附試驗的實驗教學，補充和完善了免疫學檢驗實驗教學的內容和方法，也希望能以此提高學生對其他課程學習的主動性及激發(fā)起學習的熱情。
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