接種密度和光照對脫毒馬鈴薯試管薯誘導的影響論文

　　馬鈴薯是以無性繁殖材料為基礎的作物，在生產(chǎn)中很容易被病毒感染，使正常生理機能受到干擾和破壞，造成產(chǎn)量下降，品質退化[1]。脫毒試管薯是繼脫毒試管苗之后發(fā)展起來的一種保存種質資源的材料，具有種性高、繁殖快、體積小，易儲藏、生產(chǎn)不受季節(jié)限制以及可常年繁殖等優(yōu)點[2]，不僅能用來生產(chǎn)脫毒微型薯，緩解春夏季節(jié)試管苗的生產(chǎn)壓力，還可以最大限度利用組培室現(xiàn)有資源，實現(xiàn)周年化運轉，降低生產(chǎn)成本。

　　1 材料與方法

　　選用甘肅農(nóng)墾條山集團主栽品種“大西洋”為供試材料。

　　1.1 不同接種密度對試管薯結薯率的影響 將培養(yǎng)后的基礎苗壯苗在無菌條件下切成單芽莖段，接種到裝有60 mL的A(MS+5 mg/L B9+8%糖)、B(MS+8%糖)、C(MS+2%活性炭+8%糖)3種培養(yǎng)基上，每瓶接種5段、10段、15段，放入培養(yǎng)室培養(yǎng)4周后轉入光照培養(yǎng)箱，進行試管薯誘導，溫度22±2 ℃，光照強度1 000 LX，光照8 h/a誘導結薯，3個月后收獲試管薯。

　　1.2 不同光照強度對試管薯結薯率的影響 將培養(yǎng)后的基礎苗壯苗在無菌條件下切成單芽莖段，接種到裝有60 mL的A(MS+5 mg/L B9+8%糖)、B(MS+8%糖)、C(MS+2%活性炭+8%糖)3種培養(yǎng)基上，每瓶接種10段，共接種10瓶，放入培養(yǎng)室培養(yǎng)4周后轉入光照培養(yǎng)箱，進行試管薯誘導，溫度22±2 ℃;光照強度：全黑暗條件、1 000 LX、3 000 LX，光照8 h/a誘導結薯，3個月后收獲試管薯。

　　2 實驗數(shù)據(jù)的收集與整理

　　培養(yǎng)3個月后收獲試管薯，用紗布吸干水分，統(tǒng)計試管薯的結薯數(shù)量(個)、大薯數(shù)(個)2項指標。試管薯直徑≥2 mm為結薯，5 mm以上為大薯，取10瓶平均值進行分析。

　　3 結果與分析

　　3.1 不同接種密度對試管薯誘導結薯的影響 從表1中可以看出，在相同培養(yǎng)基上，接種密度為15株/瓶試管薯的結薯數(shù)和大薯數(shù)顯著高于接種密度10株/瓶和5株/瓶的結薯數(shù)和大薯數(shù)。也可以得出，并非接種密度越小，單株營養(yǎng)越充沛結薯數(shù)和大薯數(shù)越多，而是在一定的群體效應下其結薯數(shù)和大薯數(shù)最多，而隨著接種密度的增加，結薯數(shù)雖有所增加，但是大薯率會有所下降。

　　表1 不同接種密度對試管薯誘導結薯的影響

　　培養(yǎng)基接種密度(株)結薯數(shù)(個)大薯數(shù)(個)

　　MS+5 mg/L B9+8%糖510

　　10245

　　153518

　　MS+8%糖53414

　　104320

　　155022

　　MS+2%活性炭+8%糖511

　　1042

　　15169

　　3.2 不同的光照強度對試管薯結薯率的影響 對表2數(shù)據(jù)分析得出，在3種不同的培養(yǎng)基上，光照強度3 000 LX條件下結薯數(shù)、大薯數(shù)均高于其他2組，可見3 000 LX的光強更有利于試管薯的形成和膨大;黑暗條件雖有利于試管薯的形成，但不利于進一步膨大。因此，從提高結薯數(shù)量和大薯率方面考慮，光強3 000 LX、培養(yǎng)基MS+5 mg/L B9+8%糖的組合更適合于大西洋脫毒試管薯的誘導。

　　表2 不同的光照強度對試管薯結薯率的影響

　　培養(yǎng)基光照強度(LX)結薯數(shù)(個)大薯數(shù)(個)

　　MS+5 mg/L B9+8%糖全黑暗13711

　　1000245

　　300018589

　　MS+8%糖全黑暗1380

　　10004320

　　300019730

　　MS+2%活性炭+8%糖全黑暗680

　　100042

　　3000829

　　4 小結與討論

　　本試驗從影響誘導大西洋脫毒試管薯的接種密度和光照強度進行了研究，并對生產(chǎn)環(huán)節(jié)進行了改進。在試驗中發(fā)現(xiàn)，糖濃度作為試管苗生長和試管薯誘導的重要因子，它的作用不可替代[3]，8%的糖濃度不但有利于試管薯的形成，也有利于壯苗。

　　接種密度[4]對試管薯結薯數(shù)量和大薯率具有一定影響。15株/瓶的接種密度更經(jīng)濟、更適合于大西洋脫毒試管薯的誘導。

　　在光照強度為3 000 LX、溫度22±2 ℃，每天光照8 h的培養(yǎng)條件下，MS+5 mg/L B9+8%糖的培養(yǎng)基誘導結薯數(shù)和大薯數(shù)最多，可見在離體條件下，適當?shù)墓庹諒姸葘υ嚬苁硎韷K形成和膨大具有促進作用。這一結果與部分學者認為在黑暗條件下更有利于試管薯的形成和膨大[5]有差異。主要原因是，黑暗處理時間過長，易導致試管苗黃化、枯死，不利于試管薯的進一步膨大。

　　本試驗在前人的研究基礎上進行了改進，即采用直接誘導法：將基礎苗直接接種到含8%糖濃度的試管薯誘導培養(yǎng)基上，進行試管薯的誘導。這種操作模式，不僅減少了操作環(huán)節(jié)，降低了污染，更適用于工廠化生產(chǎn)脫毒試管薯。

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