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檢驗技師考試《免疫檢驗》重要考點

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2017年檢驗技師考試《免疫檢驗》重要考點匯總

  免疫檢驗是臨床檢驗技師考試的科目之一。你知道臨床檢驗技師考試免疫學檢驗都考哪些知識嗎?下面是yjbys小編為大家代碼的免疫檢驗科目考試重點匯總,歡迎閱讀。

2017年檢驗技師考試《免疫檢驗》重要考點匯總

  免疫檢驗科目考試重點匯總

  0、免疫學檢測技術(shù)的基礎是抗原抗體反應。

  1、免疫:是機體識別和排斥抗原性異物的一種生理功能

  2、免疫防御(對外);免疫自穩(wěn)(防自身免疫病);免疫監(jiān)視(防腫瘤)。

  3、中樞免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴結(jié)、脾臟(最大)、黏膜相關(guān)淋巴組織

  4、B細胞:通過識別膜免疫球蛋白來結(jié)合抗原,介導體液免疫;B細胞受體=BCR=mIg

  表面標志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受體、補體受體、EB病毒受體和小鼠紅細胞受體。

  成熟B細胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B細胞的mIg主要為mIgM和mIgD)同時檢測CD5分子,可分為B1細胞和B2細胞。

  B細胞功能檢測方法:溶血空斑形成試驗(體液免疫功能)。

  5、T細胞:介導細胞免疫。共同表面標志是CD3(多鏈糖蛋白);輔助T細胞的標志是CD4;殺傷T細胞的標志是CD8;T細胞受體=TCR。

  T細胞和NK細胞的共同表面標志是CD2(綿羊紅細胞受體);

  CD3+CD4+CD8- = 輔助性T細胞(Th)

  CD3+CD4-CD8+ = 細胞毒性T細胞(Tc或CTL)(T細胞介導的細胞毒試驗)

  CD4+CD25+ = 調(diào)節(jié)性T細胞(Tr或Treg)

  T細胞功能檢測:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T細胞增殖。增殖試驗有:形態(tài)法、核素法。

  T細胞亞群的分離:親和板結(jié)合分離法,磁性微球分離法,熒光激活細胞分離儀分離法

  *E花環(huán)試驗是通過檢測SRBC受體而對T細胞進行計數(shù)的一種試驗;

  6、NK細胞:具有細胞介導的細胞毒作用。直接殺傷靶細胞(腫瘤細胞和病毒感染的細胞)

  表面標志:CD16(ADCC)、CD56。

  測定人NK細胞活性的靶細胞多用K562細胞株,而測定小鼠NK細胞活性則常采用YAC-1細胞株。

  7、吞噬細胞包括:單核-吞噬細胞系統(tǒng)(MPS,表面標志CD14,包括骨髓內(nèi)的前單核細胞、外周血中的單核細胞和組織內(nèi)的巨噬細胞)和中性粒細胞。(表達MHCⅡ類分子)

  8、人成熟樹突狀細胞(DC)(專職抗原呈遞功能):表面標志為CD1a、CD11c和CD83。

  9、免疫球蛋白可分為分泌型(sIg,主要存在于體液中,具有抗體功能)及膜型(mIg,作為抗原受體表達于B細胞表面,稱為膜表面免疫球蛋白)

  10、免疫球蛋白按含量多少排序:IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五類(按重鏈恒定區(qū)抗原性(CH)排序)

  免疫球蛋白含量測定:單向環(huán)狀免疫擴散法、免疫比濁法。

  11、免疫球蛋白的同種型抗原決定簇位于恒定區(qū)(CH、CL)

  12、抗體由漿細胞產(chǎn)生。抗體分子上VH和VL(高變區(qū))是抗原結(jié)合部位。

  13、IgG:血清中含量最高的免疫球蛋白(IgG1最高),血液和細胞外液中的主要抗體。也是再次免疫應答的主要抗體,是唯一能通過胎盤的抗體,大多數(shù)抗菌抗體、抗病毒抗體是IgG,某些自身抗體及超敏Ⅱ型抗體是IgG,免疫學檢測中第二抗體也以IgG為主。

  14、IgA:分血清型(單體存在)及分泌型;分泌型IgA(sIgA)為二聚體,性能穩(wěn)定,主要存在于胃腸道、支氣管分泌液、初乳、唾液、淚液中,局部濃度高,是參與黏膜局部免疫的主要抗體。

  15、IgM:為五聚體,主要存在于血液中,是Ig中分子量最大的(又稱巨球蛋白)。個體發(fā)育最早合成和分泌的抗體?乖碳ず篌w液免疫應答中最先產(chǎn)生的抗體,感染過程中血清IgM水平升高,說明近期感染。新生兒臍血中若IgM增高,提示有宮內(nèi)感染。

  16、IgE:為單體結(jié)構(gòu),正常人血清中含量最低。IgE為親細胞抗體,介導Ⅰ型超敏反應。特異性過敏反應和寄生蟲早期感染患者血清中可升高。

  17、補體:具有酶樣活性的球蛋白(肝細胞、巨噬細胞產(chǎn)生);激活途徑主要有三種:經(jīng)典途徑(以結(jié)合抗原后的IgG或IgM類抗體為主要激活劑(雙鏈DNA),C1~C9全部參與)、替代途徑(病原微生物細胞壁成分(脂多糖)直接激活補體C3,然后完成C5~C9的激活過程)、MBL途徑(由急性炎癥期產(chǎn)生的甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)與病原體結(jié)合后啟動激活)。

  18、補體系統(tǒng)中C3含量最多,C2含量最少。

  19、滅活:加熱56℃30分鐘,補體喪失活性

  20、補體清除免疫復合物的方式:吞噬調(diào)理;免疫粘附;免疫復合物抑制。

  21、完全抗原=反應原性+免疫原性。半抗原=反應原性(無免疫原性)

  22、抗原抗體結(jié)合力(分子間引力):靜電吸引、范德華力、氫鍵、疏水作用力(最強)

  23、抗原抗體反應的四大特點:特異性、可逆性、比例性、階段性;受反應條件(如溫度、pH、電解質(zhì)、抗原抗體比例等)的影響。

  24、抗體過量——前帶;抗原過量——后帶(鉤狀效應)

  25、抗原抗體反應可分為兩個階段:第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的階段,此階段反應快,僅需幾秒至幾分鐘,但不出現(xiàn)可見反應;第二階段為可見反應階段,此階段反應慢,往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。

  26、顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應?扇苄钥乖霈F(xiàn)沉淀反應。單價抗原與相應抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。

  27、木瓜酶水解IgG為2Fab+Fc;胃蛋白酶水解IgG為F(ab)2+nFc。

  28、最常用于免疫動物的佐劑是弗氏佐劑,弗氏佐劑分為弗氏完全佐劑(弗氏不完全佐劑加卡介苗)和弗氏不完全佐劑兩種。

  29、R(兔子)型抗血清是用家兔及其他動物免疫產(chǎn)生的抗體,抗原抗體反應比例合適范圍較寬,適于作診斷試劑。

  H(馬)型抗血清是用馬等大動物免疫獲得的抗體,抗原抗體反應比例合適范圍較窄,一般用作免疫治療。

  30、抗血清常見保存條件:2-8℃保存;冷凍保存(最常用);真空干燥保存(5-10年)。

  31、雜交瘤細胞放入液氮(-196℃)前,需要逐步降溫。復蘇細胞時,從液氮罐內(nèi)取出凍存管,立即浸入37℃水浴。

  32、凝集反應分為兩個階段:①抗原抗體的特異性結(jié)合;②出現(xiàn)可見的顆粒凝聚。

  33、直接凝集反應的原理是細菌、螺旋體和紅細胞等顆粒性抗原,在適當?shù)碾娊赓|(zhì)(0.85%氯化鈉)參與下可直接與相應抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集?乖=凝集原,抗體=凝集素。

  34、玻片凝集試驗:主要用于抗原的定性分析,AB0血型的測定。

  試管凝集試驗:肥達氏試驗、外斐試驗、輸血交叉配血試驗;

  35、紅細胞包被抗原,用以檢測抗體的血凝反應,稱為正向間接血凝反應(PHA)。

  紅細胞包被抗體,用以檢測抗原的血凝反應,稱為反向間接血凝反應(RPHA)。

  36、間接血凝抑制試驗:可用于檢測抗體、自身抗體、變態(tài)反應性抗體,也可測定抗原。

  37、金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)

  38、血凝試驗可在微量滴定板或試管中進行,將標本倍比稀釋,一般為1:64,同時設不含標本的稀釋液為對照孔。凡紅細胞沉積于孔底,集中呈一圓點的為不凝集。如紅細胞凝集,則分布于孔底周圍。

  39、明膠凝集試驗(間接):HIV-1抗體和抗精子抗體檢測

  40、抗球蛋白試驗,又稱Coombs試驗,是檢測抗紅細胞不完全抗體的一種很有用的方法。包括直接Coombs試驗(檢測紅細胞上的不完全抗體)和間接Coombs試驗(游離在血清中的不完全抗體)

  41、沉淀反應分兩個階段:第一階段為抗原抗體發(fā)生特異性結(jié)合,幾秒到幾十秒即可完成,出現(xiàn)可溶性小的復合物,肉眼不可見。第二階段為形成可見的免疫復合物,約需幾十分鐘到數(shù)小時才能完成,如沉淀線、沉淀環(huán)。

  42、免疫比濁:最適pH為6.5~8.5,磷酸鹽緩沖液。

  43、對流免疫電泳:抗體流向負極,抗原流向正極

  44、免疫固定電泳也用予尿液中本-周蛋白的檢測及κ、λ分型,腦脊液中寡克隆蛋白的檢測及分型。

  45、RIA(放免)核素(125Ⅰ)標記抗原,競爭抑制(標記抗原和非標記抗原競爭限量抗體);IRMA(免疫放射)核素標記抗體,非競爭結(jié)合(過量標記抗體,反應速率比RIA快,靈敏度明顯高于RIA。)

  RIA可以測定大分子和小分子抗原,但IRMA則只能測定至少有兩個抗原決定簇的抗原。

  46、常用的熒光素有:異硫氰酸(FITC)黃綠色,最常用;四乙基羅丹明(RB200)橘紅色;四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC)橙紅色;藻紅蛋白(R-RE)橙色。其他:銪(Eu3+)

  47、熒光標記蛋白的常用方法:攪拌法和透析法。

  熒光抗體效價鑒定:抗原含量為1g/L時,抗體效價>1:16

  48、時間分辨熒光免疫測定(TRFIA)以鑭系元素(如:銪)化合物為熒光標記物。

  49、偏振免疫測定的偏振波長是485nm(藍光)。

  50、辣根過氧化物酶(HRP):底物(1)鄰苯二胺(OPD),(2)四甲基聯(lián)苯胺(TMB) ELISA中應用最廣泛的底物。

  堿性磷酸酶(ALP):底物:對-硝基苯磷酸脂(p-NPP)

  β-半乳糖苷酶(β-Gal):底物:4-甲基傘酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)

  51、異相法:先分離,后測定;均相法:不分離,直接測。

  52、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):

  必要的試劑:①固相的抗原或抗體;②酶標記的抗原或抗體;③酶反應的底物。

  抗原測定:蛋白大分子抗原用得最多的是雙抗體夾心法(HBsAg)。只有單個抗原決定簇的小分子,則使用競爭抑制法。

  抗體測定:通常使用間接法(HCV、HIV)、雙抗原夾心法(HBsAb)、競爭法(HBcAb、HBeAb)和捕獲法(IgM)等

  *待測孔最后顯示的顏色深淺與標本中的待測抗原或抗體呈正相關(guān)的是:雙抗體夾心法、雙位點一步法、間接法測抗體;

  53、化學發(fā)光底物有:直接化學發(fā)光劑:吖啶酯和三聯(lián)吡啶釕;酶促反應發(fā)光劑:(標記酶HRP)魯米諾及其衍生物、(標記酶為堿性磷酸酶)AMPPD;

  54、免疫印跡實驗中常選用多克隆抗體。

  55、外周血單個核細胞的分離的分層液常用:Ficoll(由上到下為血漿,單個核細胞,粒,紅)和Percoll(由上至下:死細胞,單個核細胞,淋,紅,粒)。

  56、純淋巴細胞群的采集有:黏附貼壁法,吸附柱過濾法,磁鐵吸引法,Percoll分離液法。

  57、T細胞和B細胞的分離:E花環(huán)沉降法,尼龍毛柱分離法

  58、淋巴細胞活力測定:臺盼藍染色法,死細胞為藍色。

  59、CD4是HIV受體,HIV感染時CD4/CD8比值明顯降低。

  60、CD4/CD8升高常見于自身免疫性疾病;而CD4/CD8降低常見于病毒感染、惡性腫瘤和再生障礙性貧血等。

  61、(ELISA)雙抗體夾心法是用于細胞因子測定的最常用方法。

  62、流式細胞儀:前向散射光(FS)反映顆粒的大小。側(cè)向散射光(SS)反映顆粒內(nèi)部結(jié)構(gòu)復雜程度、表面的光滑程度。熒光(FL)反映顆粒被染上熒光部分數(shù)量的多少。

  63、免疫熒光標記最常用的熒光染料:異硫氰酸熒光素(FITC)亮綠色熒光。德州紅紅色熒光。藻膽蛋白類橙色至紅色熒光。

  64、臨床上常用三色熒光抗體標記將CD3-CD16+CD56+淋巴細胞確定為NK細胞。

  65、AIDS患者的一個特征性免疫診斷指標表現(xiàn)為:T淋巴細胞總數(shù)減少,T細胞亞群CD4Th/CD8Tc比例倒置,Th/Tc<1.0,Th細胞數(shù)量顯著下降甚至測不出,而Tc細胞數(shù)量可正;蛟黾,NK細胞減少或活力下降,B淋巴細胞群則處于正常范圍。

  65、強直性脊柱炎——HLA-B27

  66、SLE患者以IgG、IgA升高較多見。類風濕關(guān)節(jié)炎患者以IgM增高為主。

  67、M蛋白(MP)是B淋巴細胞或漿細胞單克隆異常增殖(>30g/L)所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白。多無免疫活性,故又稱副蛋白。臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等

  68、M蛋白-最基本方法:血清蛋白區(qū)帶電泳技術(shù)

  M蛋白-粗篩試驗:血清免疫球蛋白定量(單向瓊脂免疫擴散法和免疫比濁法)

  M蛋白-鑒定,首選方法:免疫固定電泳(IFE)技術(shù)(區(qū)帶電泳技術(shù)與特異性抗血清的免疫沉淀反應相結(jié)合)是臨床最常用的方法。

  69、IgD降低見于原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、矽肺

  70、CSF中的濃度:IgG>IgA>IgM。神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤時,以IgA和IgM升高為主。

  (感染、血管病變、系統(tǒng)性疾病=IgG升高)

  71、本-周蛋白即尿中游離的免疫球蛋白輕鏈。尿中可測得,血中呈陰性(原因是本-周蛋白分子量小,極易迅速自腎臟排出,血中含量并不升高)

  72、冷球蛋白又稱冷免疫球蛋白,在-4℃時發(fā)生沉淀,于37℃時又復溶解。采血是冷球蛋白檢測的關(guān)鍵,宜在體溫條件下采集和保存靜脈血。

  73、補體結(jié)合試驗(CFT),梅毒的診斷,華氏反應。

  74、非均相熒光免疫測定:時間分辨熒光免疫測定法。

  均相熒光免疫測定:熒光偏振免疫測定法。

  75、鏈球菌感染:ASO(膠乳凝集試驗、免疫散射比濁法)

  76、傷寒沙門菌有菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原。肥達反應,效價≥1:80為陽性

  77、卡氏肺孢菌,又稱卡氏肺孢子蟲,為類真菌。

  78、Ⅰ型超敏反應:由特異性IgE抗體介導產(chǎn)生,其發(fā)生速度最快。(青霉素、支氣管哮喘)

  提高Th1細胞活性,減少IL-4的分泌,可降低IgE的產(chǎn)生,阻斷IgE介導的Ⅰ型超敏反應。

  參與Ⅰ型超敏反應:肥大細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞。

  79、Ⅱ型超敏反應:又稱細胞毒型或細胞溶解型超敏反應,它是由靶細胞表面的抗原與相應IgG或IgM類抗體結(jié)合后,在補體(細胞溶解)、巨噬細胞(吞噬)和NK細胞(ADCC作用)參與下,引起的以細胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應。(輸血反應、新生兒溶血癥、自身免疫性溶血性貧血、藥物過敏性血細胞減少癥、肺出血腎炎綜合征、甲狀腺功能亢進)

  80、Ⅲ型超敏反應:由可溶性免疫復合物沉積于局部或全身多處毛細血管基底膜,通過激活補體,并在血小板、嗜堿性粒細胞、中性粒細胞等的參與下,引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為主要特征的炎癥反應和組織損傷。(Arthus反應、類Arthus反應、血清病、鏈球菌感染后腎小球腎炎、類風濕關(guān)節(jié)炎、SLE)/81、Ⅳ型超敏反應:又稱遲發(fā)型超敏反應(DTH),是效應T細胞與特異性抗原結(jié)合后,引起的以單個核細胞浸潤和組織損傷為主要特征的炎癥反應。(細胞免疫)效應性CD4+Th1細胞識別抗原后活化,可釋放IFN-γ、TNF、淋巴毒素(LT)、IL-3、GM-CSF、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)等多種細胞因子。

  常見Ⅳ型超敏反應性疾。焊腥拘赃t發(fā)型超敏反應(結(jié)核分枝桿菌、病毒、原蟲)、接觸性皮炎、移植排斥反應。(結(jié)核菌素皮試、斑貼試驗)

  82、變性的IgG可刺激機體產(chǎn)生抗變性IgG抗體(類風濕因子)

  83、ITP患者血清中存在有抗血小板抗體,該抗體可以縮短血小板的壽命。

  84、抗乙酰膽堿受體抗體:對重癥肌無力(MG)具有診斷意義。

  85、毒性彌漫性甲狀腺腫患者血清中有抗促甲狀腺激素受體(TSHR)的IgG型自身抗體。(甲狀腺功能的亢進)

  86、多發(fā)性肌炎是以損害肌肉為主要表現(xiàn)的自身免疫性疾病,如果同時有皮膚損害,則稱為皮肌炎。

  87、75%的PSS患者有抗核抗體陽性,抗Scl-70抗體是PSS的特異性抗體,80%~95%的局限性硬皮病患者抗著絲點抗體陽性。

  88、自身免疫病(AID)的特征:高滴度自身抗體,病理特點為免疫炎癥損傷與抗原分布一致,能建動物模型。

  89、抗DNP抗體(抗核蛋白抗體)通常完全被DNA和組蛋白吸收,是形成狼瘡細胞的因子。

  90、ANA陽性的熒光現(xiàn)象分:核膜型、均質(zhì)型、斑點型、核仁型。ANA常為自身免疫病的初篩試驗。

  91、ENA是可提取核抗原的總稱,分子中不含DNA。

  92、抗dsDNA抗體對SLE有較高的特異性。抗Sm抗體也是SLE的特異性標志之一。此兩項常為SLE確診指標。(對疑為SLE的患者,應先進行ANA和抗dsDNA抗體的檢測,當ANA和(或)抗dsDNA抗體陽性時,再作抗ENA抗體譜的檢測。如有抗Sm抗體和(或)抗RNP抗體陽性,可實驗室診斷為SLE)

  93、抗核RNP抗體:為MCTD(混合性結(jié)締組織病)的診斷指標。

  94、抗SSA/抗SSB抗體:為干燥綜合征(SS)的診斷指標。(當ANA陽性而抗dsDNA抗體陰性,抗ENA抗體譜中抗SsA抗體和(或)抗ssB抗體陽性,可實驗室診斷為干燥綜合征。)

  95、抗Jo-1抗體:多發(fā)性肌炎(PM)患者常為陽性。

  96、抗Scl-70抗體:進行性系統(tǒng)性硬皮癥(PSS)的診斷指標。

  97、NCA:原發(fā)性小血管炎的特異性血清標志物

  98、內(nèi)風濕性關(guān)節(jié)炎(RA):自身抗體有RF、抗角蛋白抗體(AKA)、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(anti-CCP)。

  99、Farr法測定dsDNA抗體的特異性高,為公認標準法,當抗dsDNA抗體結(jié)合率大于20%時對SLE有意義。

  100、抗線粒體抗體(AMA):原發(fā)性膽汁性肝硬化

  101、巨球蛋白血癥:以分泌IgM的漿細胞惡性增殖為病理基礎的疾病。好發(fā)于老年男性,主要表現(xiàn)骨髓外浸潤,以肝、脾和淋巴結(jié)腫大為主要體征并伴有血黏滯過高綜合征,如表現(xiàn)為視網(wǎng)膜出血。(血清呈膠凍狀難以分離,電泳時血清有時難以泳動,集中于原點是該病的電泳特征)

  102、異常免疫球蛋白檢測的應用原則

  初篩實驗:區(qū)帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測和尿本-周蛋白定性檢測。

  確證實驗:免疫電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白亞型、血清及尿中輕鏈蛋白的定量檢測。

  103、HIV誘導的免疫應答

  1.體液免疫應答HIV感染后,機體可產(chǎn)生:中和抗體、抗P24殼蛋白抗體、抗gp120和抗gp41抗體

  2.細胞免疫應答:CD8+T細胞應答、CD4+T細胞應答。

  104、HIV抗原檢測:核心抗原p24(ELISA)

  105、免疫印跡法判斷標準為:①HIV抗體陽性:至少有兩條膜帶(gp41/gp120/gp160)或至少一條膜帶與p24帶同時出現(xiàn);②HIV抗體陰性:無HIV抗體特異性條帶出現(xiàn);③HIV抗體可疑:出現(xiàn)HIV特異性條帶,但帶型不足以確認陽性者。

  CD4+T細胞計數(shù)是反映HIV感染患者免疫系統(tǒng)損害狀態(tài)的最明確指標。當CD4+T細胞低于500/μl,則易機會性感染;低于200/μl,則發(fā)生AIDS。

  106、CEA大于60μg/L時可見于結(jié)腸、胃、肺癌。手術(shù)6周后CEA水平正常。

  107、AFP——原發(fā)性肝癌。PSA——前列腺癌

  108、糖類抗原有:CA125:上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌;CA15-3:乳腺癌;CA19-9:胰腺癌、結(jié)直腸癌。

  109、神經(jīng)母細胞瘤和小細胞肺癌(基因有P53,RB)的標志物:神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)

  110、排斥反應有:宿主抗移植反應(HVGR)和移植物抗宿主反應(GVHR)。

  111、移植物存活與HLA配型的關(guān)系是:①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位點數(shù)越多,移植物存活幾率越高;②供、受者HLA-DR位點相配更重要,因為HLA-DR和HLA-DQ基因有很強的連鎖不平衡,DR位點相配的個體,通常DQ位點也相配;③不同地區(qū)HLA匹配程度與移植結(jié)果的關(guān)系有著不同的預測價值。

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