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影響生化檢測(cè)的常見(jiàn)因素分析
除疾病之外，還有許多因素也可影響生化檢測(cè)的結(jié)果。這些因素可能在分析過(guò)程的前中后。下面是yjbys小編為大家?guī)?lái)的關(guān)于影響生化檢測(cè)的常見(jiàn)因素分析的知識(shí)，歡迎閱讀。
分析前因素
分析前因素與病患本身，樣本收集，樣本處理等因素相關(guān)，這些因素通常會(huì)影響到分析前體液樣本的組成。包括以下幾個(gè)方面：
生物因素：病患與生具來(lái)的且可被控制的因素。
非生物學(xué)因素：包括樣本收集，處理，儲(chǔ)存，抗凝劑的使用。
分析中因素
分析中因素是能夠影響分析程序的因素。
干擾因素：脂血癥，溶血，黃疸，高蛋白血癥，藥物。以及其他更多情況。
質(zhì)量控制：確保測(cè)試操作和結(jié)果的準(zhǔn)確性。
分析后因素涉及到實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)呈現(xiàn)、存儲(chǔ)和傳遞給臨床醫(yī)生的不同方式。
只要有可能，盡量控制以上三類(lèi)因素，減少對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
1、分析前因素
在實(shí)驗(yàn)室分析樣品之前，分析前因素影響樣品的組成(因此也將影響樣品質(zhì)量)。
這些因素是實(shí)驗(yàn)室分析中最重要和最常見(jiàn)的誤差來(lái)源，卻常在分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)被忽略。
應(yīng)該盡量控制這些因素，減少對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響�？刂品治銮耙蛩匕ǐF醫(yī)或技師進(jìn)行樣本的充分采集，準(zhǔn)備和處理。當(dāng)然也存在一些不能被控制的因素，例如評(píng)估疾病引起的結(jié)果時(shí)，必須考慮并識(shí)別物種的遺傳性生理差異。
分析前因素包括生物性和非生物性因素。
1.1 生物性因素
某些因素是動(dòng)物固有的，例如品種，年齡，和性別。但在評(píng)估檢測(cè)結(jié)果時(shí)需考慮。記住，實(shí)驗(yàn)室提供的絕大多數(shù)的參考值適用于健康的成年動(dòng)物。獸醫(yī)可以控制其他生理性因素，例如當(dāng)準(zhǔn)備血液樣本時(shí)，確保動(dòng)物已禁食12小時(shí)。
1.1.1 固有的生物性因素
物種：物種特異性導(dǎo)致分析來(lái)源和分析結(jié)果都存在顯著差異。例如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是小動(dòng)物而不是大動(dòng)物的肝特異性酶。因此，必須將動(dòng)物的生化結(jié)果與相同物種的參考區(qū)間進(jìn)行比較，例如，不能使用馬的參考區(qū)間來(lái)分析驢的生化結(jié)果。
品種：生化分析中存在與品種相關(guān)的差異，但這些差異通常較小。健康馱馬比純種良馬通常肌酸激酶值更高。
年齡：許多生化分析成分隨年齡而變化，幼畜生化結(jié)果經(jīng)常有變化，但不是因?yàn)榧膊�，而是與年齡有關(guān)，比如所有動(dòng)物幼畜的堿性磷酸酶都偏高。一般來(lái)說(shuō)，由臨床病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供的大多數(shù)參考范圍多通過(guò)成年動(dòng)物確定，不太適用于幼齡動(dòng)物。
性別：雌性動(dòng)物懷孕或哺乳相關(guān)的生理狀態(tài)，可在非疾病狀態(tài)下影響分析結(jié)果。在一些物種中，可能存在不同性別的單獨(dú)參考區(qū)間，例如，人體內(nèi)的血清鐵。一般來(lái)說(shuō)，家畜幾乎沒(méi)有與性別相關(guān)的檢測(cè)偏差。
1.1.2 可控的生物性因素
樣本采集技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化可以使這些因素對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響最小化。如果這些因素是不可避免的或被需要的(例如，在運(yùn)動(dòng)后采集樣品以檢測(cè)馬中的橫紋肌溶解癥)，結(jié)果分析期間必須考慮這些因素。
近期食物攝入：這將導(dǎo)致餐后脂血。脂血可能影響某些血漿成分的測(cè)量分析方法，從而導(dǎo)致結(jié)果無(wú)效�？梢酝ㄟ^(guò)禁食12小時(shí)收集適當(dāng)?shù)臉悠穪?lái)避免餐后脂血。事實(shí)上，禁食后脂血升高是繼發(fā)于疾病的脂質(zhì)異常代謝的有利證據(jù)。
最近的進(jìn)食可能影響與脂血癥無(wú)關(guān)的某些血漿成分濃度，例如葡萄糖。這種效應(yīng)因?yàn)槭澄锎x的差異(例如非反芻與反芻動(dòng)物相比)存在明顯的物種依賴(lài)性。
應(yīng)激：應(yīng)激(繼發(fā)于動(dòng)物處理或潛在疾病)將對(duì)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果產(chǎn)生較大影響。應(yīng)對(duì)幼齡或未馴化動(dòng)物的應(yīng)激尤為重要，在采集血液樣本時(shí)應(yīng)可能降低動(dòng)物應(yīng)激。
運(yùn)動(dòng)：運(yùn)動(dòng)對(duì)于血漿成分的影響取決于運(yùn)動(dòng)的類(lèi)型和強(qiáng)度。一般而言，應(yīng)該在動(dòng)物運(yùn)動(dòng)之前進(jìn)行血液樣本的采集。
藥物：給藥方式，例如肌肉內(nèi)給藥將直接影響分析結(jié)果。藥物本身也可干擾被分析物的測(cè)量。
1.1.3 藥物干擾
可分成兩大類(lèi)：藥物的生理作用(體內(nèi))或代謝物對(duì)被分析物的影響
在體外，藥物及其代謝物的某些物理或化學(xué)性質(zhì)也會(huì)干擾實(shí)際檢測(cè)過(guò)程。對(duì)檢測(cè)能產(chǎn)生顯著干擾的治療藥物是血紅蛋白類(lèi)氧載體(HBOC)，例如血液增強(qiáng)劑Oxyglobin。它是從牛血清中發(fā)現(xiàn)的一種呈黑紅色的聚合血紅蛋白。因?yàn)檫@種化合物的固有顏色，Oxyglobin在治療貧血?jiǎng)游锟稍斐上嗤谘獫{/血清溶血的情況。它在血液學(xué)，生化和尿檢的結(jié)果中都產(chǎn)生了明顯的干擾，在生化檢測(cè)中的干擾取決于檢測(cè)方式和儀器的使用。制造商正在努力開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)補(bǔ)償或消除來(lái)自HBOCs的干擾，因此未來(lái)可能在給予HBOCs的動(dòng)物中也能獲得精確的檢測(cè)結(jié)果。這提示我們血液樣品應(yīng)在給予貧血?jiǎng)游颒BOC之前收集，以盡量減少對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該被告知任何治療藥物的使用，以此可采取措施降低藥物造成的影響。然而，獸醫(yī)學(xué)中關(guān)于藥物對(duì)動(dòng)物或分析技術(shù)有哪些影響還了解甚少，除了例如皮質(zhì)類(lèi)固醇，溴化物的例子。所以，任何異常的生化檢測(cè)結(jié)果應(yīng)該結(jié)合動(dòng)物完全的用藥史分析。
1.2 非生理性因素
非生理因素包括樣本采集，處理和運(yùn)輸。應(yīng)盡量控制這些因素以減少對(duì)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的影響。
1.2.1 樣本采集
靜脈穿刺：清潔的靜脈穿刺是減少人為誤差的重要條件之一。錯(cuò)誤的靜脈穿刺技術(shù)可能引起溶血，從而通過(guò)多種方式導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生誤差。例如高鉀紅細(xì)胞將導(dǎo)致鉀假性升高，紅細(xì)胞中AST導(dǎo)致AST假性升高(比如貓)，檢測(cè)過(guò)程中化學(xué)反應(yīng)釋放相關(guān)成分導(dǎo)致CK假性增高。止血試驗(yàn)中錯(cuò)誤的靜脈穿刺產(chǎn)生的組織因子將污染樣品，導(dǎo)致樣品管中的沉淀凝血，以無(wú)法預(yù)知的方式延長(zhǎng)或縮短凝血時(shí)間測(cè)定�？赏ㄟ^(guò)將血液直接收集到檸檬酸鹽抗凝血?jiǎng)?預(yù)填充注射器或直接進(jìn)入真空采血管)中減少誤差影響。
抗凝劑：抗凝劑將影響檢測(cè)結(jié)果。
血液檢測(cè)：最好使用EDTA抗凝血?jiǎng)�，檸檬酸鹽將稀釋樣本，肝素將引起細(xì)胞凝集，兩者都將減少計(jì)數(shù)。
生化檢測(cè)：肝素化血漿或血清(無(wú)抗凝血?jiǎng)?樣品適用于生化檢測(cè)。因?yàn)橥换颊叩难獫{與血清的檢測(cè)結(jié)果不同。所以如果需要連續(xù)監(jiān)測(cè)同一患者，應(yīng)使用相同的樣品。血漿里含有纖維蛋白原，而血清中沒(méi)有(在凝血期間移除)，因此檢測(cè)結(jié)果里血漿的總蛋白(和球蛋白，因?yàn)槔w維蛋白原是β球蛋白)的結(jié)果比血清高。凝血期間鉀從血小板中釋放，因此血清鉀高于血漿鉀(后者結(jié)果更準(zhǔn)確)。氟化物-草酸鹽抗凝劑可用于葡萄糖的測(cè)量，它會(huì)抑制細(xì)胞代謝，應(yīng)馬上將血清/血漿從細(xì)胞分離，因?yàn)樵摽鼓獎(jiǎng)⿻?huì)誘發(fā)嚴(yán)重的溶血。檸檬酸鹽和EDTA抗凝劑不適用于生化檢測(cè)，因?yàn)樗鼈儠?huì)螯合二價(jià)陽(yáng)離子(鈣，鎂)并含有高濃度的鈉(檸檬酸鹽)或鉀(EDTA)。即使是在輕度EDTA污染的血液樣品中進(jìn)行生化檢測(cè)都會(huì)出現(xiàn)超高鉀和超低鈣的結(jié)果。一些酶的活性也需要二價(jià)陽(yáng)離子。因此，在含有EDTA或檸檬酸鹽做抗凝劑的血漿中，這些酶(例如堿性磷酸酶)的檢查結(jié)果會(huì)虛假偏低。
凝血測(cè)試：最好使用檸檬酸抗凝劑(對(duì)鈣有輕度螯合作用，因此鈣可以回到樣本中以進(jìn)行凝血篩選測(cè)定)。不能使用肝素(樣品不會(huì)凝結(jié))，EDTA可以使用(鈣可以回到樣本中)，但不是很可靠所以不推薦使用。
1.2.2 樣本處理和儲(chǔ)存
樣品收集后，應(yīng)嚴(yán)格注意樣品處理，以盡量減少這些因素對(duì)結(jié)果的影響。
分離：只要有可能，尤其是當(dāng)樣品收集和實(shí)驗(yàn)室送檢之間有延遲時(shí)，應(yīng)在樣品收集后盡快分離細(xì)胞中的血清或血漿。包括使樣品凝結(jié)(對(duì)于血清)和離心樣品以分離出血液組分。應(yīng)該將血清或血漿從細(xì)胞中分離并置于新的凝集(無(wú)抗凝血?jiǎng)?管中。管應(yīng)標(biāo)記為“血漿”或“血清”。未與細(xì)胞分離的樣品具有較低的葡萄糖濃度(在儲(chǔ)存期間由細(xì)胞消耗)，即使沒(méi)有明顯的溶血，濃度較高的一些成分，將從紅細(xì)胞中滲出，例如馬血液中的鉀。血清分離器(或Corvac)的專(zhuān)用管，材料含有硅膠，可以將血清和凝塊分離。即使使用這些管，仍應(yīng)該取出血清并放置到新的凝血管中，尤其當(dāng)專(zhuān)用管不是全新?tīng)顟B(tài)(硅膠如果裂開(kāi)也將影響樣本)。
標(biāo)記：患者的所有體液樣品應(yīng)正確標(biāo)記好患者姓名，標(biāo)識(shí)和樣品類(lèi)型(例如血清，血漿，滑液，腹膜液)。實(shí)驗(yàn)室不負(fù)責(zé)樣品的正確標(biāo)記，可以想象，一個(gè)不正確的標(biāo)簽標(biāo)本將對(duì)病人護(hù)理產(chǎn)生多么嚴(yán)重和有害的后果。
儲(chǔ)存：一般情況下，通常從樣品收集到實(shí)驗(yàn)室送檢之間至少有24小時(shí)的延遲。因此，從細(xì)胞中快速分離血清/血漿和保持樣品冷卻(使用冰袋)對(duì)于保持酶活性最大化和防止結(jié)果出現(xiàn)誤差是非常有必要的。如果預(yù)計(jì)長(zhǎng)時(shí)間(> 24小時(shí))，建議將樣品冷凍，并使用干冰將樣品運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。樣本存儲(chǔ)的方法取決于樣本檢測(cè)類(lèi)型，一些樣品凍結(jié)也不是很穩(wěn)定，所以應(yīng)該經(jīng)常向?qū)嶒?yàn)室咨詢(xún)不同樣本的儲(chǔ)存方法。
2、分析中因素
分析中因素通過(guò)影響儀器測(cè)量分析物的過(guò)程。由于儀器類(lèi)型的差異，不同實(shí)驗(yàn)室會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生不同影響。分析因素由樣品固有屬性引起，例如血脂的干擾，或分析儀本身的固有特征。儀器本身的誤差可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證程序降至最小化。
干擾
脂血，游離血紅蛋白(溶血)，黃疸(高膽紅素)，高球蛋白和藥物，這些內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾程度取決于儀器類(lèi)型、檢測(cè)方法以及樣品中的干擾物質(zhì)數(shù)量(即實(shí)驗(yàn)室特異性)。在康奈爾大學(xué)臨床病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室中使用的化學(xué)分析儀將測(cè)量樣品中脂血，溶血和黃疸的含量，并將這些值作為指數(shù)，用于評(píng)價(jià)這三種內(nèi)源性干擾物質(zhì)對(duì)化學(xué)結(jié)果的影響程度。
高蛋白血癥：?jiǎn)慰寺∶庖咔虻鞍?副蛋白)，特別是當(dāng)以高濃度存在時(shí)，通過(guò)以下機(jī)制干擾生化分析：
高粘度：影響樣品體積，粘度取決于免疫球蛋白的類(lèi)別(免疫球蛋白如何形成高粘度，為何形成?)
與被檢測(cè)物結(jié)合：與一些被檢測(cè)物結(jié)合的免疫球蛋白將增加或減少分析成分，例如已經(jīng)有一例犬慢性淋巴細(xì)胞白血病和犬IgM單克隆丙種球蛋白病病例中發(fā)現(xiàn)了高磷酸鹽血。
體積變化：這類(lèi)似于脂血癥的影響。什么疾病導(dǎo)致單克隆丙種球蛋白病?
藥物：給藥方式不同的藥物干擾可能使結(jié)果產(chǎn)生偏差。在獸醫(yī)學(xué)中最常見(jiàn)的藥物干擾之一是犬溴化物(抗驚厥藥)療法，檢測(cè)樣品的氯化物值將人為升高。臨床獸醫(yī)應(yīng)該告知實(shí)驗(yàn)室使用在待檢動(dòng)物身上的的任何藥物，這有助于減少藥物對(duì)化學(xué)測(cè)試的影響(但通常不會(huì)消除)。
檢測(cè)程序
控制和最小化影響測(cè)定性能的因素包括質(zhì)量保障。
臨床病理實(shí)驗(yàn)室的目標(biāo)是提供準(zhǔn)確和精確的結(jié)果。質(zhì)量保證是通過(guò)實(shí)施清楚明確的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程和質(zhì)量控制程序來(lái)實(shí)現(xiàn)。
質(zhì)量控制程序取決于測(cè)量對(duì)照血清中被分析物的濃度(同預(yù)定的分析物值對(duì)比)。通常落在預(yù)定(可接受)限度之外的控制值表示程序存在問(wèn)題�？的螤柎髮W(xué)的臨床病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室每天都會(huì)對(duì)分析儀器進(jìn)行對(duì)照檢測(cè)。除非對(duì)照值在可接受的范圍內(nèi)，否則不對(duì)患者樣品進(jìn)行分析。此外，實(shí)驗(yàn)室參與外部質(zhì)量控制計(jì)劃，分析未知樣品時(shí)候，會(huì)將結(jié)果與使用相同儀器的其他實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果進(jìn)行比較。如果本校實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果與平均值的偏差較大，表明存在程序性問(wèn)題，應(yīng)即時(shí)糾正。
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