臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的采集和處理知識(shí)
臨床檢驗(yàn)的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制(totalqualitycontrol,TQC。即指對(duì)影響臨床檢驗(yàn)結(jié)果可靠性的各方面因素及各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制)和全過(guò)程質(zhì)量控制(即指對(duì)實(shí)驗(yàn)工作的全過(guò)程進(jìn)行質(zhì)量控制和質(zhì)量管理)。下面是yjbys小編為大家?guī)?lái)的臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的采集和處理知識(shí),歡迎閱讀。
一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義
臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本是指為完成某項(xiàng)或多項(xiàng)臨床化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目而采集的一定量的血液,包括抗凝及非抗凝血。
二、血液標(biāo)本的采取
(一)采取部位
1.靜脈采血:應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈,小兒和新生兒有時(shí)用頸靜脈和前囟靜脈。
2.動(dòng)脈采血:主要用于血?dú)夥治鰰r(shí)。常用的動(dòng)脈為股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈、橈動(dòng)脈和臍動(dòng)脈。
3.毛細(xì)血管采血:適用于僅需微量血液的試驗(yàn)或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端,小兒有時(shí)為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm(<2.5mm),采血局部應(yīng)無(wú)炎癥、水腫等。
(二)標(biāo)本類(lèi)型
臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用,除前者不含纖維蛋白原外,其余多數(shù)化學(xué)成分無(wú)差異;全血只有在紅細(xì)胞內(nèi)成分與血漿成分相似時(shí)才用;血?dú)夥治、血紅蛋白電泳等時(shí)用全血,一般臨床化學(xué)分析多不用全血。
三、全血處理為血清或血漿
血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清(漿)從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來(lái)。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個(gè)階段,對(duì)各不同階段均有具體要求。
(一)離心前階段
即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時(shí)間。
1.血清:標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集,不可用木棍等剝離凝血塊。通常于室溫(22~25oC)放置30~60min血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集;冷藏標(biāo)本凝集緩慢;加促凝劑時(shí)凝集加快(標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合5~10次,以確保促凝劑作用)。
2.血漿:需用血漿標(biāo)本時(shí),必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,而且采血后必須立即輕輕顛倒采血管混合5~10次(以確?鼓齽┌l(fā)揮作用),5~10min后即可分離出血漿。
3.冷藏標(biāo)本:標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝,穩(wěn)定某些溫度依賴性成分?但全血標(biāo)本一般不能冷藏;血鉀測(cè)定標(biāo)本冷藏不得超過(guò)2h。血液中兒茶酚胺、pH/血?dú)、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測(cè)時(shí)需用制冷的標(biāo)本。
標(biāo)本需要冷藏(2~8oC)時(shí),標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于冰屑或冰水混合物(不可用大冰塊),并且必須保證標(biāo)本與制冷物充分接觸,保證制冷物達(dá)到標(biāo)本的高度。
4.代謝抑制劑和防腐劑:某些添加劑加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝,可以防止血液標(biāo)本貯存時(shí)分析物濃度的變化。血液葡萄糖測(cè)定時(shí),如在血液中加入氟化鈉,在血細(xì)胞未分離的情況下,葡萄糖在22~25oC時(shí)可穩(wěn)定24h,2~8oC時(shí)可以穩(wěn)定48h;但在新生兒和兒童標(biāo)本,由于紅細(xì)胞壓積高,用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用;甲醛-草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測(cè)定;氟化鈉-麝香草酚混合劑因能抑制酶活性,不適用于酶學(xué)測(cè)定。
5.標(biāo)本采集現(xiàn)場(chǎng):(1)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室,尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過(guò)22oC時(shí)此點(diǎn)更為重要;(2)血液標(biāo)本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置,以減少管中內(nèi)容物振動(dòng),促進(jìn)凝血完全,防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外濺等;(3)已收集的血液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理,要防止標(biāo)本管振蕩所造成的溶血;溶血可影響測(cè)定結(jié)果。有嚴(yán)重影響(使結(jié)果升高)的項(xiàng)目有:乳酸脫氫酶、血清門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白;引起值得注意的影響的項(xiàng)目有:血清鐵(↑)、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(↑)和血清甲狀腺素(↓);輕度受影響(增加)的有:總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶;(4)應(yīng)避免對(duì)光線敏感的'分析物暴露在人造光或太陽(yáng)光(紫外線)照射下。如VA、VB6、β-胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測(cè)定時(shí),標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類(lèi)似物質(zhì)包裹保護(hù)起來(lái)。
6.標(biāo)本運(yùn)送:全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場(chǎng)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,如果運(yùn)送距離較遠(yuǎn),特別是因分析物穩(wěn)定性有影響,必要時(shí)可于采血現(xiàn)場(chǎng)分離出血清或血漿后,再送往實(shí)驗(yàn)室;標(biāo)本運(yùn)送過(guò)程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等,要確保分析成分的穩(wěn)定性;標(biāo)本管在運(yùn)送過(guò)程中要保持管口封閉、向上垂直放置。
7.實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備:(1)要有標(biāo)本收取記錄(應(yīng)認(rèn)真核對(duì)檢驗(yàn)中清單,對(duì)有關(guān)情況要認(rèn)真記錄,標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登記);(2)對(duì)接受的標(biāo)本要予以分類(lèi)準(zhǔn)備離心;(3)實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、管口向上,垂直位放置。管塞移去后血中CO2丟失,會(huì)造成pH增加,離子鈣和酸性磷酸酶減少,尤其pH變化會(huì)影響某些檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性;(4)標(biāo)本凝集時(shí)間要充分;加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心;加促凝劑的標(biāo)本可于采血后5~15min盡早離心;抗凝的全血標(biāo)本(鋅、鋰、原卟啉等測(cè)定時(shí))可以不離心;(5)冷藏(2~8oC)標(biāo)本應(yīng)保持這個(gè)溫度直到準(zhǔn)備離心。推薦用溫度控制離心機(jī);(6)離心標(biāo)本前不主張用小木棒或類(lèi)似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊,人為剝離會(huì)誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時(shí),一定要十分注意,動(dòng)作一定要輕柔。
(二)離心階段
即指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時(shí)間。
1.離心時(shí)間和相對(duì)離心力(RCF):臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí),RCF(1000~1200)×g,離心時(shí)間為5~10min。
2.溫度控制離心:離心時(shí)產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定,臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí)必須采用溫度控制離心機(jī)。一些溫度依賴性分析物(如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺苷酸、兒茶酚胺等)應(yīng)在4oC分離;無(wú)特殊溫度要求的分析物,離心溫度應(yīng)設(shè)定在20oC~22oC;溫度低于15oC可以人為地使血鉀測(cè)定值增高;冷藏運(yùn)送的標(biāo)本必須在要求的溫度下離心。
3.關(guān)于再離心:標(biāo)本離心最好一次完成,若需再次離心,應(yīng)距上次離心相隔時(shí)間很短;對(duì)于含有分離物質(zhì)的血標(biāo)本絕不可以再離心。
(三)離心后階段
指標(biāo)本離心后和用于檢測(cè)的血清或血漿被取出一定量之前的一段時(shí)間。
1.血清或血漿與接觸的血細(xì)胞和凝塊的分離應(yīng)在采血后盡快(2h內(nèi))完成。
2.分離的血清或血漿的貯存:實(shí)驗(yàn)室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時(shí)間,是分析物穩(wěn)定性和測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的重要參數(shù)。(1)于22oC~25oC血清或血漿的保存不超過(guò)8h;(2)實(shí)驗(yàn)于8h內(nèi)不能完成時(shí),血清或血漿應(yīng)置2oC~8oC保存;(3)48h內(nèi)不能完成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,或分離的血清或血漿需貯存48h以上時(shí),應(yīng)于-20oC保存;(4)標(biāo)本不可反復(fù)凍融(只能凍融一次),且不可貯存于無(wú)霜冰箱(可造成樣品溫度變化);(5)離心后分離凝膠(凝膠屏障)上面的血清可保存2~5天,但必須保證凝膠的完整性;但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時(shí),離心后必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存于密閉的試管中。
四、血清或血漿分離物質(zhì)
是指將血清或血漿從全血中分離出來(lái)的物質(zhì),包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。
(一)凝膠物質(zhì)
為一類(lèi)具有特定粘度和特殊比重(介于血清或血漿與凝塊之間的比重)的惰性凝膠物質(zhì),用(1000~1100)×gRCF離心10min,能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障,從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開(kāi)。
(二)非凝膠物質(zhì)
是由惰性物質(zhì)(玻璃、塑料、纖維、毛氈等)構(gòu)成的小珠、盤(pán)、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或血漿與凝塊之間的比重,將其輕輕加入血管中,用(1000~1100)×gRCF離心10min時(shí),可透過(guò)血液移動(dòng)至血清或血漿與血細(xì)胞、凝塊之間,形成一個(gè)界面,使血清或血漿被分離出來(lái)。
(三)完整的凝膠管系統(tǒng)
該系統(tǒng)是由一個(gè)真空采血管(硅化塑料管)、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝劑或抗凝劑組成。使用時(shí)要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書(shū)和有效期,并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。
隨著檢驗(yàn)方法日益完善,高精檔次的自動(dòng)化儀器的大量應(yīng)用,以及檢驗(yàn)的科學(xué)管理和檢驗(yàn)工作人員技術(shù)水平不斷提高,明顯降低檢測(cè)過(guò)程中的影響因素和干擾,而分析檢測(cè)前的各類(lèi)影響或干擾因素相對(duì)增多,F(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)對(duì)檢測(cè)標(biāo)本的留取與收集提出較高的要求,而廣大就診患者也必需了解留取標(biāo)本的基本知識(shí),遵照囑托,配合檢驗(yàn)人員,以使檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確準(zhǔn)確可靠。
門(mén)診檢驗(yàn)常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血)、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
標(biāo)本采集注意事項(xiàng)
一、血液標(biāo)本
盡量避免生理因素的影響,有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。采集血液標(biāo)本的條件應(yīng)盡量一致為宜,如無(wú)法避免,應(yīng)說(shuō)明在標(biāo)本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對(duì)燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類(lèi)等)受生理因素影響波動(dòng)過(guò)大,比較時(shí)宜便條件盡量一致。出、凝血功能的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè),不宜服用抗凝、促凝藥物,以免影響測(cè)定結(jié)果。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜,有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項(xiàng)目的檢測(cè)必須及時(shí)而快速,有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測(cè)定。切忌在輸液的同側(cè)靜脈抽血做各項(xiàng)檢驗(yàn)。
二、尿液標(biāo)本
同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù),即Addis(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日8時(shí)的所有尿液),因時(shí)間較長(zhǎng),細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。
24小時(shí)尿(第一天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,Ca2十等,檢測(cè)不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),要求無(wú)菌,沖洗外明后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,最少12m1,最好50ml,定時(shí)尿須全部收集,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
三、糞便標(biāo)本
糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的件簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對(duì)外觀無(wú)異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲(chóng)蟲(chóng)體及作蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。
查日本血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲(chóng)卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門(mén)周?chē)櫶幪幨萌〔⒘⒓寸R檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),試驗(yàn)前3日禁食肉類(lèi)及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,維生素C等整理搜集。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。
四、腦脊液標(biāo)本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類(lèi)不被:有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少:細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無(wú)菌管,第一管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全。
五、胸腹水標(biāo)本
與腦脊液標(biāo)本一樣,采集后的標(biāo)本注意安全,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜。
六、前列腺液標(biāo)本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢,須注意防止標(biāo)本蒸干,量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。
七、陰道分秘物標(biāo)本
陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事、盆浴、明道檢查、明道灌洗及局部上藥等.取材所用器械需要清潔。一般用鹽水浸濕棉拭子自陰道或陰道彎后部、宮頸管口取材,制生理鹽水涂片后觀察分泌物標(biāo)本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。
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