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血液及骨髓標本的采集和處理
正確的采取、處理與運送細菌培養(yǎng)的標本是臨床細菌檢驗成功的關鍵。標本采取與處理的規(guī)范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎;而標本采取與處理不符合要求,則細菌培養(yǎng)的結果毫無意義。下面是小編為大家?guī)淼难杭肮撬铇吮镜牟杉吞幚淼闹R,歡迎閱讀。
血液及骨髓標本的采集和處理
一、檢查項目
血液、骨髓液的細菌培養(yǎng)
二、標本采集
【標本采集前的注意事項】
應在抗生素應用前或停藥一周后采集標本,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集:
【標本送檢指征】
病人出現以下臨床表現,或同時具備以下幾種臨床表現時應采集血培養(yǎng)。
1.發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃)
2.寒戰(zhàn)
3.白細胞增多(>10×10^9/L,特別有“核左移”時)
4.粒細胞減少(成熟的多形核白細胞<1×10^9/L)
5.血小板減少
6.皮膚、粘膜出血
7.昏迷
8.多器官衰竭
9.血壓降低
10.呼吸加快
幾種特殊情況:
1.可疑新生兒敗血癥時,除發(fā)熱或低溫外,很少培養(yǎng)出細菌,應增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。
2.老年菌血癥病人可能不發(fā)熱或不低溫,如伴有身體不適、肌痛或中風,可能是感染性心內膜炎,也應采取血培養(yǎng)。
骨髓培養(yǎng)與血液培養(yǎng)的送檢指征是基本一致的,臨床常規(guī)血液感染有指征時以抽取血培養(yǎng)為主。但當骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者,抽取骨髓培養(yǎng)陽性率會遠高于血培養(yǎng)。
【標本采集的容器】
血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或手工血培養(yǎng)瓶。
【標本的采集方法】
防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物引起的污染是血培養(yǎng)的關鍵問題,采血前嚴格執(zhí)行消毒程序是十分重要的。
1.皮膚消毒程序
嚴格按以下三步法進行:
(1) 75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上。
(2) 用一根碘酊或聚維酮碘(碘伏)棉簽消毒皮膚,1~2%碘酊作用30s或聚維酮碘作用60s,從穿刺點向外以1.5~2cm直徑畫圈進行消毒。
(3) 75%酒精脫碘。
對碘過敏的病人只能用75%酒精消毒,消毒60s,待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。
2.培養(yǎng)瓶消毒程序
(1) 用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。
(2) 酒精作用60s。
(3) 在血液注入血培養(yǎng)瓶之前,用無菌紗布或棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。
3.培養(yǎng)瓶接種程序
抽取血液后,不要換針頭,直接注入血培養(yǎng)瓶中,輕輕顛倒混勻,以防血液凝固。如果同時作需氧和厭氧培養(yǎng),應先將標本接種到厭氧瓶中,然后再注入需氧瓶,嚴格防止將空氣注入厭氧瓶中。
【標本采集注意事項】
1.血培養(yǎng)采集的時間和頻率
(1) 采血培養(yǎng)應盡量在抗菌藥物使用之前,在24h內采集2~3份血培養(yǎng)(一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應視為單份血培養(yǎng)),每次2瓶。因為研究已證實,2~3份血培養(yǎng)足以檢測所有的菌血癥和真菌血癥。
(2) 入院前2周內接受抗菌藥物治療的患者,連續(xù)3天,每天采集2份,可選用能中和或吸附抗菌藥物的培養(yǎng)基。
(3) 對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱的患者,應在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5~1h采集血液,或于寒戰(zhàn)或發(fā)熱后1h采集。因為發(fā)熱時血液中可能沒有細菌。
(4) 可疑為急性原發(fā)性菌血癥、真菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關節(jié)炎或肺炎的患者,應在不同部位采集2~3份血培養(yǎng)。
(5) 不明原因發(fā)熱,如隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱,先采集2~3份血標本,24~36h后估計體溫升高之前,再采集2份以上。
(6) 可疑為菌血癥或真菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,應改變血培養(yǎng)方法,選擇其它種類的培養(yǎng)瓶,如高滲培養(yǎng)瓶、中和抗生素培養(yǎng)瓶、結核菌培養(yǎng)瓶等,以獲得罕見的或苛氧的微生物。
(7) 可疑為細菌性心內膜炎,在1~2h內多部位采集3份血標本,如果24h陰性,再采取3份以上的血標本。
2.采血量
成人:推薦每個血培養(yǎng)瓶應加的血量為5~10ml,血液和肉湯比為1:5~10(體積:體積)。
兒童:因很難獲得大量的血液,一般靜脈采血1~5ml用于血培養(yǎng)。
血液量太多或太少都不利于細菌的檢出,血液的培養(yǎng)量每增加1ml,陽性率增加3~5%。人體血液內包含各種抑制細菌生長的因子或抗生素,注入血液太多可能會抑制細菌的生長。
骨髓采血量一般為1~2ml。
標本運送過程中必須保證其安全,防止溢出,避免細菌污染。
【標本的保存】
含血樣的培養(yǎng)瓶應立即送往實驗室;如不能及時送檢,應將其放在室溫,切忌冰箱存放。因為某些苛氧菌可在冰箱溫度中死亡,而使培養(yǎng)陽性率下降。
在運往實驗室的途中如果天氣寒冷,應采取一定的保溫措施。
靜脈血采集方法、注意事項和采集樣品所用材料的安全處置
1、止血帶或壓脈器:采集靜脈血時,止血帶壓迫靜脈時間不宜過長,以不超過 40 秒為宜,
否則容易引起淤血、靜脈擴張,并且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、pH 值降低、K + 、Ca 2+ 、肌酸激酶升高等。
2、采血時間與部位:大多數化驗檢查要求清晨、空腹、采集靜脈血應盡可能避免在輸液同時取血,輸液不僅使血液稀釋,而且對實驗室檢查結果發(fā)生嚴重干擾,特別是血糖和電解質。
3、避免溶血、雜質污染:采血器具必須無菌、干燥、潔凈.避免特別用力抽吸和推注、避
免化學污染和細菌污染引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同,樣本溶血可使
紅細胞某些成分釋放,影響實驗室檢查結果。
4、血樣的采集:血樣要求在每一天的同一時間采集,理想的時間是早晨 7:00 到 8:00,尤其是監(jiān)測為目的時,更要保證標本采集時間的統(tǒng)一。最后一次食物和液體攝入應在前
一天下午 6:00 到 7:00 (急診檢驗例外)。血樣采集應在不服藥期間,如在早晨服前。血樣采集時,患者應仰臥位,采血點應在同一靜脈區(qū),通常為手臂靜脈。
5、標本采集后須立即送檢,放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復
穿刺,易導致標本溶血或有小凝塊,影響檢測結果。
6、采集血培養(yǎng)標本時應先注射厭氧瓶,盡量減少接觸空氣時間。
7、微量元素測定采集標本的注射器和容器不能含游離金屬。
8、采集樣品所用材料的安全處置:使用后的采血針、注射器針頭等銳器物應當直接放入不能刺穿的利器盒內或毀型器內進行安全處置,禁止對使用后的一次性針頭復帽,禁止用手直接接觸使用過的針頭、刀片等銳器物;注射器針筒、棉簽等其他醫(yī)療廢物放入黃色醫(yī)療廢物袋中,醫(yī)療廢物和生活垃圾分類收集存放。消毒毀形后的醫(yī)療廢物必須交給指定的醫(yī)療廢物處理廠,不得擅自廢棄。
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